Fortyndingsberegninger

Fortyndingsberegninger ved fremstilling af en fortyndingsrække

Fortynding

Fortynding handler om at gøre koncentrationen af en væske, et stof eller en bakteriekultur tyndere, eller forklaret på en anden måde, at gøre det mindre koncentreret.
Du kan opleve at skulle lave en fortynding i laboratoriet og/eller besvare en teoretisk opgave omkring fremstillingen af en fortynding. I denne video kan du lære om hvordan du gør det ift. fortynding af en stamopløsning.

Fortyndingsrække

En bakteriekultur er koncentreret. For at fortynde den anvendes en fortyndingsrække.
I denne video lærer du, hvad en fortyndingsrække er, hvordan man fremstiller og anvender den, samt lærer du nogle formler at kende som er gode at bruge, når du arbejder med fortynding af bakterier.

Før du ser videoen

Inden du ser denne video, vil det være en god idé at se Stamopløsning.

Når du har set videoen

Du har nu lært en anden situation, hvor man foretager en fortynding end ved en stamopløsning, i dette tilfælde fremstiller man en fortyndingsrække for at fortynde en bakteriekultur. Hvis du har lyst til at lære om en tredje situation at kende, hvor en fortynding anvendes, kan du se videoen Standardkurve.
Hvis du vil se mere om hvordan bakterier vokser, kan du se videoen Mikroorganismers vækstfaser.

Opgaver til Fortyndingsrække

Efter at have set videoen om anvendelsen af en fortyndingsrække til en bakteriekultur, kan du teste dig selv i om du har forstået videoen.

Multiple choice spørgsmål

Spørgsmål 1:
Hvad er en overnatskultur?

a) En overnatskultur er en bakteriekoloni som har vokset i en væske natten over
b) En overnatskultur er en væske som har vokset natten over
c) En overnatskultur er en bakterie som at blevet sat udenfor om natten
d) Ingen af de ovenstående svarmuligheder

Spørgsmål 2:
Hvad er en 10-foldsfortyndingsrække?

a) Når fortyndingsfaktoren er 10 i alle fortyndingsrørene som anvendes i fortyndingsrækken
b) Når der altid anvendes 10 fortyndingsrør i fortyndingsrækken
c) Når en fortyndingsrække har ét fortyndingsrør med en fortyndingsfaktor på 10, mens de andre fortyndingsrør har en anden fortyndingsfaktor
d) Når der udtages 10 gange fra ét fortyndingsrør som anvendes i fortyndingsrækken

Spørgsmål 3:
Hvad er enheden for fortyndingsfaktoren?

a) [CFU/mL]
b) [CFU]
c) [mL]
d) Fortyndingsfaktoren har ingen enhed

Spørgsmål 4:
Hvilke formler kan man bruge til at beregne fortyndingsfaktoren?
(Forkortelser: FF = fortyndingsfaktor, Konc. = koncentration, el. = eller)

a) FF = (Antal bakteriekolonier [CFU]) / (Konc. af fortyndet overnatskultur [CFU/mL])

og FF = (Total volumen [µL] el. [mL]) / (Udtaget volumen [µL] el. [mL])

b) FF = (Volumen af overnatskultur [mL]) / (Konc. af fortyndet overnatskultur [CFU/mL])

og FF = (Total volumen [µL] el. [mL]) / (Udtaget volumen [µL] el. [mL])

c) FF = (Konc. af overnatskultur [CFU/mL]) / (Konc. af fortyndet overnatskultur [CFU/mL])

og FF = (Total volumen [µL] el. [mL]) / (Udtaget volumen [µL] el. [mL])

d) FF = (Konc. af overnatskultur [CFU/mL]) / (Konc. af fortyndet overnatskultur [CFU/mL])

og FF = (Total konc. [CFU/mL]) / (Udtaget volumen [µL] el. [mL])

Problemopgaver

Opgave 1:

Du vil gerne tælle 200 bakteriekolonier på en agarplade, og du ved, at du udtager 100 µL fra et fortyndingsrør og tilsætter det på agarpladen. Hvad skal koncentrationen være i fortyndingsrøret?

Opgave 2:

Koncentrationen i et fortyndingsrør er 4×10² CFU/mL og koncentrationen af overnatskulturen er 4×10⁸ CFU/mL. Hvad er fortyndingsfaktoren (FF) for fortyndingen af overnatskulturen?

Opgave 3:

Du har en overnatskultur, hvor der er 3×10⁸ CFU/mL af bakterien i beholderen. Spørgsmålet er, hvor meget skal overnatskulturen fortyndes for, at du kan tælle 30 CFU, dvs. 30 bakteriekolonier/pletter på agarpladen. Til agarpladen har du tilsat 100 µL af den fortyndet overnatskultur.

Opgave 4:

Tegn, hvordan fortyndingsrækken kommer til at se ud ved brug af resultatet fra Opgave 3.
Til at fremstille fortyndingsrækken bruger du fortyndingsrør med 900 µL fortyndingsvand.
På tegningen skal der skrives: koncentrationen af overnatskulturen, volumen udtaget til fortyndingsrør, koncentrationen i de enkelte fortyndingsrør, volumen udtaget fra fortyndingsrør til agarpladen, og antallet af bakteriekolonier der kan tælles på agarpladen.

Fortyndingsberegninger ved fremstilling af en standardkurve

Fortynding

Fortynding handler om at gøre koncentrationen af en væske, et stof eller en bakteriekultur tyndere, eller forklaret på en anden måde, at gøre det mindre koncentreret.
Du kan opleve at skulle lave en fortynding i laboratoriet og/eller besvare en teoretisk opgave omkring fremstillingen af en fortynding. I denne video kan du lære om hvordan du gør det ift. fortynding af en stamopløsning.

Standardkurve

Hvis man gerne vil bestemme koncentrationen af et stof, kan man anvende en standardkurve. For at opbygge standardkurven bruger man en række fortyndinger med kendte koncentrationer af samme stof, som hver har fået målt deres absorption af lys. Koncentrationen indsættes på x-aksen og absorbans på y-aksen. Ved at måle absorbansen af den ukendte koncentration, kan koncentrationen bestemmes vha. standardkurven.

Før du ser videoen

Inden du ser denne video vil det være en god idé at se Stamopløsning og Fortyndingsrække.

Når du har set videoen

Du har nu lært en tredje situation, hvor det er godt at kunne beregne fortyndinger. Her lærte du om fremstillingen af en standardkurve, når en væskes forskellige koncentrationer måles ved absorbans. Hvis du gerne vil lære mere om absorbans, kan du se videoen Spektrofotometri.

Opgaver til Standardkurve

Efter at have set videoen om, hvordan man fremstiller en fortyndingsrække til en standardkurve, kan du teste dig selv i om du har forstået videoen.

Multiple choice spørgsmål

Spørgsmål 1:
Hvilke betegnelser er der på x- og y-aksen af standardkurven?

a) x-akse: koncentration og y-akse: bølgelængde
b) x-akse: absorbans og y-akse: koncentration
c) x-akse: koncentration og y-akse: absorbans
d) x-akse: koncentration og y-akse: volumen

Spørgsmål 2:
Hvad er formålet med en standardkurve?

a) At få en ret linje mellem koncentrationerne 5 M og 10 M
b) At absorbansen er ens for alle koncentrationer
c) At den anvendes til at beregne hvor meget lys der skal bruges
d) At den anvendes til at forudse en ukendt koncentration af et stof ved at måle dens absorption af lys

Spørgsmål 3:
Bruger man forskellige bølgelængder for den samme standardkurve?

a) Ja, fordi koncentrationerne er forskellige
b) Nej, man bruger én bølgelængde for standardkurven, fordi der måles på ét stof i standardkurven
c) Nej, man bruger altid en bølgelængde på 400 nm for alle standardkurver
d) Ja, fordi det giver en bedre standardkurve

Problemopgaver

Opgave 1:

Du vil gerne have at den fortyndede stamopløsning har et volumen på 0,75 L efter du har tilsat 0,25 L af stamopløsningen, som fortyndes i saltvand. Hvor mange mL saltvand, skal du bruge?

Opgave 2:

Du har en stamopløsning med en koncentration på 1 M. 100 mL af stamopløsningen tilsættes til X mL saltvand i et glas. Koncentrationen af den fortyndede stamopløsning i glasset er nu 0,5 M.
Du skal besvare følgende spørgsmål (følg gerne spørgsmålene i denne rækkefølge):

1. Hvad er fortyndingsfaktoren (FF) for fortyndingen af stamopløsningen?

2. Hvad er det totale volumen i glasset med 100 mL stamopløsning og X mL saltvand?

3. Hvor mange mL saltvand er der i glasset?